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双荧光素酶报告基因检测

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描述

  荧光素酶报告基因试验是检测转录因子与靶基因启动子区域是否结合及结合能力的重要方法。通过构建一个将靶启动子的特定片段插入到荧光素酶表达序列前方的报告基因质粒,如pGL3-basic等,将要检测的转录因子表达质粒与报告基因质粒共转染293细胞或其它相关的细胞系。如果此转录因子能够激活靶启动子,则荧光素酶基因就会表达,荧光素酶的表达量与转录因子的作用强度成正比,加入特定的荧光素酶底物,荧光素酶与底物反应,产生荧光,通过检测荧光的强度可以测定荧光素酶的活性,从而判断转录因子是否能与此靶基因启动子片段有作用。

双荧光素酶报告基因检测

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